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论同位素标记法的新应用

投稿时间:2013-03-26 22:41 投稿人:李静业 【字号: 访问量:
人类应用放射性同位素的历史已有几十年,其中最重要的应用便是同位素示踪技术,这种技术有很重要的一点便是定位的准确,目前的技术甚至可以达到分子水平。这便为基因测序工作提供了可能。
首先,用四种不同的放射性同位素分别标记脱氧核糖核苷酸AGCT的磷酸分子,分离出标记成功的核苷酸(可以采用差速离心法多次离心进行分离),以经过标记的核苷酸为培养液(要求培养液中所有核苷酸分子皆经过了标记),细胞在这样的培养液中培养一个细胞周期,则其基因组序列将被标记。
只需要分离出一整套进过标记的基因组,将其分解为DNA链后置于检测器下,检测各个核素的准确位置,则可根据放射性核素的位置精确测定核苷酸位置,进而得到精确的基因组序列及其每个核苷酸在基因组中的精确位置。
这种方法的优点是快速精确,可以方便的得到精确的基因组图谱,但缺点也很明显,那就是这种方法要求的精确度太高,操作要求太高,一旦操作失误便会出错,基因组在分离的过程中假若略有失误,也会导致基因位置发生变化,另外,如果筛选核苷酸时分离的纯度不够也将导致结果发生变化,只有被标记的DNA链上每一个核苷酸都被成功标记,结果才可能准确,否则便会出现极大的未知情况。例如:一条DNA链上只有一个核苷酸未被成功标记,那么,在无操作失误并且检测器足够精确的情况下,测得的DNA序列便会缺失一个核苷酸。
尽管有以上种种缺点,但这项技术快速精确的优点仍不容忽视,随着科技的发展,以上困难必将一一攻克,那时,基因组图谱的绘制必将变成一件极其简单的事情。
另,这种方法也可应用于蛋白质的二三级结构检测上,可以用C、S、P分别标记20种氨基酸,只需以检测器分别对蛋白质上的标记物进行检测即可。